Копирование и сортировка ДНК
| English | Русский |
|---|---|
| amplify/ˈæmplɪfaɪ/ | расширять |
| gel electrophoresis/dʒel ɪˌlektrəʊfɔːˈriːsɪs/ | гель-электрофорез |
| microarray/ˈmaɪkrəʊəreɪ/ | микрочип (микромассив) |
| genome/ˈdʒiːnəʊm/ | геном |
| polymerase chain reaction/ˌpɒlɪməˈreɪz tʃeɪn rɪˈækʃn/ | полимеразная цепная реакция (ПЦР) |
| Taq polymerase/tæk ˌpɒlɪməˈreɪz/ | Таq-полимераза |
Усиление материала
- Для изучения ДНК часто требуются миллионы копий.
- ПЦР создает их; гель-электрофорез сортирует фрагменты по длине.
- Микромассивы и базы данных обрабатывают полные геномы.
ПЦР
- Полимеразная цепная реакция (ПЦР) клонирует и усиливает ДНК — создавая миллионы копий.
- Он повторяет циклы нагревания и охлаждения, используя термостабильный фермент Taq-полимеразу Taq.
- Каждый цикл удваивает количество ДНК.
Термоциклер автоматизирует циклы нагревания/охлаждения в ПЦР.
Цепная полимеразная реакция (ПЦР)
Проходите один цикл. Нагрев разделяет ДНК, праймеры связываются, полимеразы копируют — и количество удваивается при каждом цикле.
Цепная полимеразная реакция (ПЦР) используется для того, чтобы:
ПЦР амплифицирует ДНК посредством повторяющихся циклов нагрева/охлаждения с использованием Taq-полимеразы.
Метод, который создает миллионы копий образца ДНК, называется цепной реакцией ⟦полимеразной⟧.
ПЦР (цепная полимеразная реакция) использует Taq-полимеразу для копирования ДНК на протяжении многих циклов.
В каждом цикле ПЦР количество ДНК:
Каждый цикл копирует каждую цепь, поэтому ДНК примерно удваивается — обеспечивая экспоненциальный рост.
Расставьте этапы одного цикла ПЦР в правильном порядке.
Денатурация → отжиг → элонгация, затем повторение. Удвоение делает процесс экспоненциальным.
Гелевый электрофорез
- Гелевый электрофорез разделяет фрагменты ДНК по длине.
- Фрагменты движутся через гель в электрическом поле к +-полюсу.
- Более короткие фрагменты проходят дальше, поэтому длины распределяются по полосам.
Электрическое поле тянет фрагменты ДНК через гель; более короткие двигаются дальше, сортируя их по длине
Фрагменты ДНК разделены на светящиеся полосы с помощью гелевого электрофореза, видимые под ультрафиолетовым светом
При электрофорезе в геле более короткие фрагменты ДНК:
Фрагменты движутся к положительному (+) полюсу; более короткие проходят дальше, разделяя ДНК по длине.
При электрофорезе в геле более короткие фрагменты ДНК проходят дальше через гель, чем более длинные.
ДНК имеет отрицательный заряд, поэтому движется к положительному (+) электроду; мелкие фрагменты легче проникают сквозь гель, поэтому они уходят дальше.
Микрочипы и базы данных
- Микрочипы изучают целые геномы и определяют, какие гены активны (регистрируя их мРНК).
- Базы данных хранят последовательности ДНК и белков, чтобы ученые могли сравнивать их из любой точки мира.
Микрочипы используются для:
Микрочипы выявляют активность генов во всем геноме, захватывая мРНК экспрессируемых генов.
Вы поняли
- ПЦР амплифицирует ДНК (циклы нагревания/охлаждения, Taq-полимераза); каждый цикл удваивает её
- гелевый электрофорез сортирует фрагменты по длине — короткие двигаются дальше к + полюсу
- микрочипы показывают, какие гены активны; базы данных хранят последовательности для сравнения